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爬行动物是体内受精还是体外受精?

爬行动物之所以被成为爬行动物是因为它是第一代真正脱离水环境下繁殖的生物,所以肯定是体内受精。

更低等的生物才是体外受精的,比如鱼类和两栖类。当然可能也有个别是特别的。

动物细胞在体外培养,其生命期要经过哪几个阶段?

胞培养技术指的是细胞在体外条件下的生长,在培养的过程中细胞不再形成组织(动物)。

培养物是单个细胞或细胞群。细胞在培养时都要生活在人工环境中,由于环境的改变,细胞的移动或受一些其他因素的影响,培养时间加长,传代导致细胞出现单一化型。

细胞体外培养生命期

细胞在培养过程中持续增殖和生长的时间。一般根据细胞种类、性状和原供体的年龄的情况而定。

如:二倍体成纤维细胞,在不冻存和反复传代条件下可传30~50代,相当于150~300个细胞增殖周期,能维持一年左右的生命,细胞便开始凋亡(apoptosis)。 细胞在生存过程中经历以下三个阶段

1.原代培养期(primary culture)

组织到第一次传代时间大约为1~4周

特点:

细胞移动活跃,但分裂不旺盛,多呈二倍体核型。

原代与体内原组织形态结构和功能活动基本相似。

各细胞的遗传性状互不相关,细胞相互依存性强,如果把这种稀释分散成单细胞,在软琼脂培养基中进行培养,细胞克隆的形成率(cloning efficiency)下降,表明细胞独立生存性差。

2.传代期(passage)

初代培养细胞一经传代便称之为细胞系(cell line)

特点:

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一般细胞在10代以内冻存。

冻存配方:

向培养液加入保护剂二甲基亚砜(DMSO)或甘油,封入安瓶中。

存于在液氮中温度可达到-196℃,可长期储存。如解冻后细胞复苏,仍能继续增殖生长,细胞性状不受影响,成为保存细胞最主要的手段。

3.衰退期

特点:细胞仍生存 增殖减慢 不增殖 轮廓增强 衰退凋亡

注意:细胞在三期中的任何一期(一般发生在传代后期或衰退期)在某些因素影响下,如血清质量不佳、病毒污染、温度和pH不稳等,细胞可能发生自发转化(spontaneous transformation);

细胞可能获得永生性(immortality) 或称为恶性性(malignancy)。细胞获得持久性的增殖能力,这样的细胞群体称为连续细胞系(continuous cell line)。而细胞获得不死性后,细胞核型大多变成异倍体(heteroploid)接触抑制消失。

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